需要是發明之母，但專利權是發明之父
二代測序對游離DNA進行測序前需要進行文庫構建，傳統構建流程因DNA雙鏈的損傷導致模板利用率下降，尤其是甲基化測序建庫時因需要進行亞硫酸氫鹽處理，會導致大量DNA損傷，最終可進行測序模板占原始模板的比例不到10%。游離DNA往往含量極低，在檢測過程中模板利用率的高低是檢測準確性的保證，因此需要開發出更優、更高效的建庫方法，以提高模板利用率。
優樂復生基于目前文庫構建過程中所遇到的問題發明了一種對單鏈脫氧多核苷酸進行接頭鏈接的方法，進而提供了一種二代測序文庫構建方法——Euler Tequila建庫技術，本發明的方法不但適用于正常DNA，還適用于FFPE樣本、古DNA、亞硫酸氫鹽處理后的DNA樣本等損傷嚴重的樣本?？蓪⒛０謇寐侍岣咧?0%以上，保證損傷樣本、微量樣本檢測準確性。
膀胱尿路上皮癌的主要臨床診斷方法包括膀胱鏡檢查、尿液脫落細胞學檢查、B超、CT掃描等。膀胱內窺鏡檢查被視為膀胱尿路上皮癌診斷的金標準，但是該檢查方法具有侵入性，且可能導致尿路感染、尿道損傷、膀胱損傷等并發癥。尿液脫落細胞學檢查如熒光原位雜交技術(Fluorescence in situ hybridization，FISH)檢測等能夠對BCa進行輔助診斷，但總體敏感性和特異性均不滿意，分別為50％和85％。因此，開發一種新的靈敏度更高、特異性更強、且檢測周期更短的無創膀胱尿路上皮癌檢測方案是非常必要的。特別地，由于膀胱尿路上皮癌具有早期癥狀不明顯，發病后進展迅速、病理明確診斷困難等特點，增加檢出率和縮短檢測時間顯得尤為關鍵。
本發明提供的用于膀胱尿路上皮癌診斷的檢測方法及試劑盒具有優良的靈敏度和特異性。實驗數據表明在使用尿液診斷受試者是否患有膀胱尿路上皮癌時，靈敏度為0 .889，特異性為0 .945；在使用尿液鑒別分型肌層浸潤性膀胱尿路上皮癌和非肌層浸潤性膀胱尿路上皮癌時，靈敏度為0 .850，特異性為1 .000。對臨床上膀胱尿路上皮癌的診斷、治療，以及后期的監測與預后評估具有很大的積極意義，為進一步進行早期診斷提供了理論依據。
α?地貧的標準產前診斷方法是對高危夫婦進行基因分型篩查，進而采用絨毛活檢術、羊膜腔穿刺 術等方法對胎盤或胎兒細胞進行產前診斷 。然而，這些常規方法是侵入式的，可能會對胎兒和孕婦造成損傷、甚至有胎兒流產的風險，同時也會增加孕婦的心理負擔。有研究顯示，絨毛活檢術、羊膜腔穿刺術的手術流產風險分別為0 .22％、0 .11％。直至目前，α?地貧的無創診斷面臨著巨大的挑戰。重型α?地貧(??/??)是由于α?珠蛋白基因的長片段缺失型導致，而無細胞DNA (Cell?free DNA， cfDNA，也稱為游離DNA) 呈高度片段化狀態，因此，傳統的α?地貧基因檢測方法，例如缺口聚合酶鏈式反應(Gap?PCR)、多重連接探針擴增技術(MLPA)等，并不適用于α?地貧基因的無創檢測。
本發明提供了一種可用作胎兒α?地中海貧血病的無創產前基因診斷的胎兒DNA標記物，檢測方法和檢測試劑盒。與現有技術相比，本公開涉及的技術方案能夠更加安全、高效、準確、經濟地對胎兒α?地中海貧血病開展無創產前基因診斷。
